Guylaine Tremblay (née le 9 octobre 1960 à Petite-Rivière-Saint-François, Québec) est une comédienne québécoise.
Elle s’est fait connaître au cours des années 1990 grâce à son rôle de l’autoritaire Caro Paré dans la série culte La petite vie.
Elle a aussi joué dans les séries Histoires de filles, Annie et ses hommes, Les Rescapés et Unité 9.

Vedette du petit écran, elle obtient plusieurs prix Gémeaux et MétroStar (aujourd’hui prix Artis) au fil des ans pour son rôle dans Annie et ses hommes (2002-2009), où son personnage d’épouse et de mère aimante rallie le grand public. Elle reçoit aussi des récompenses pour Emma et La Petite Vie, ainsi que pour Albertine, en cinq temps et 24 Poses (portraits), adaptations pour la télévision de pièces qu’elles a interprétées au théâtre.